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文獻解讀

RayBiotech抗體芯片在腫瘤研究中的應用

時間:2015-05-19 作者:技術部 來源:本站 瀏覽:2073

 

RayBiotech抗體芯片在腫瘤研究中的應用




雜志名稱:  PNAS《美國科學院院報》(IF 9.809)

文獻題目:Inhibition of tumor cell proliferation and motility by fibroblasts is both contact and soluble factor dependent(download)

本實驗所用產品:RayBiotech人AAH-BLM-1抗體芯片

(507個生長、趨化、血管、炎癥等細胞因子抗體芯片

實驗樣品:細胞上清

研究背景:

    正常人和小鼠成纖維細胞在體外與腫瘤細胞共培養時可以抑制腫瘤細胞的生長,且抑制的能力與成纖維細胞的供體和纖維母細胞的起源部位有關。以往的實驗說明要在成纖維細胞形成單細胞層后接種腫瘤細胞才有會起到有效的抑制作用。本研究發現成纖維細胞是抑制腫瘤細胞的活性,抑制作用依賴于兩種分子,一種是細胞基質和細胞表面的蛋白,另外一種是成纖維細胞與腫瘤細胞共培養時分泌的因子。本文用抗體芯片篩選了成纖維細胞單獨培養細胞上清和與腫瘤細胞共培養的細胞上清,篩查到非常多有意義的差異因子。

研究思路

實驗方法

1.1 樣品準備

  成纖維細胞,前列腺癌細胞株PC3;

1.2 將兩種細胞進行分別培養及共培養;

1.3 腫瘤細胞的活性檢測和增殖能力檢測;

1.4 RayBiotech抗體芯片篩選不同培養上清中生物標志物的差異; 

2 結果

2.1 共培養上清抑制腫瘤的生長

 活性檢測和增殖能力檢測結果表明,成纖維細胞與腫瘤細胞共培養的細胞上清可以顯著抑制腫瘤細胞的活性及增殖能力,而成纖維細胞單獨培養的細胞上清則沒這種能力。如下圖所示,通過采用不同顏色標記不同時間段的腫瘤,再將顏色進行疊加,可以看到腫瘤的生長受到了抑制。

  

 

 

  

2 .2 RayBiotech芯片篩查不同情況下上清的相關蛋白變化

 

507抗體芯片檢測結果顯示,MMP3是在共培養中成纖維細胞分泌降低的唯一蛋白,其他的8個蛋白GDF-15、DKK1、EMAP-II、EDA-A2、CXCL2、uPA、Nidogen1、Galectin-3在共培養中成纖維細胞分泌增高。

 

  

  

 2.3  推測抑制作用的分子機制

對腫瘤細胞的增殖和活性的抑制作用需要兩個關鍵因素,首先,第一個關鍵因素是結構分子(表面受體和ECM),成纖維細胞形成單細胞層后接種腫瘤細胞共培養,兩種細胞產生接觸才會有抑制作用;其次,第二個關鍵因素是成纖維細胞和腫瘤細胞共培養相互作用后分泌的可溶性因子起到抑制腫瘤細胞生長的作用。
 
   

結論

腫瘤微環境以及腫瘤抑制作用一直是研究熱點,RayBiotech抗體芯片在該研究中起到非常重要的指引作用,有助于進一步深層次挖掘分子機制。


 
本文使用Raybiotech AAH-BLM-1 抗體芯片 

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