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文獻解讀

RayBiotech抗體芯片在風濕免疫研究中的應用

時間:2015-05-19 作者:技術部 來源:本站 瀏覽:2525




系統性紅斑狼瘡尿液標志物篩查


雜志名稱:  Molecular & Cellular Proteomics 《分子與細胞蛋白質組學》(IF7.254)

文獻題目:Urinary Angiostatin - A Novel Putative Marker of Renal Pathology Chronicity in Lupus Nephritis

本實驗所用產品:RayBiotech人AAH-CYT-G4000抗體芯片

(274個生長、趨化、血管、炎癥等細胞因子抗體芯片

實驗樣品:尿液

研究背景:

    尋找系統性紅斑狼瘡(SLE)生物標志物非常的迫切,因為SLE具有較高的腎功能衰竭發病率。用RayBiotech抗體芯片篩選狼瘡性腎炎患者尿液中的細胞因子表達差異,發現SLE病人血管抑素表達水平明顯升高。血管抑素是纖溶酶原活性片段,對血管生成和炎癥有調節作用。后續ELISA驗證和ROC分析證明血管抑素可以有效區分活動期和穩定期SLE。免疫組化結果表明血管抑素在患者腎小管上皮細胞上表達。進一步研究證明尿血管抑素水平與腎臟病理慢性指數密切相關,與活性指數無關。

研究思路

實驗方法

1.1 樣品準備

  尿液收集;

  樣品分組:SLE病人組(5例),正常對照組(3例);

1.2 RayBiotech細胞因子抗體芯片檢測尿液樣品中274個細胞因子的表達及其差異;

1.3 ELISA驗證血清和尿液樣品中血管抑制素的表達;

1.4 免疫組化驗證腎組織血管抑制素的表達;

1.5 WB探討尿液血管抑制素的表達分子機制; 

2 結果

2.1 RayBiotech芯片篩查SLE病人與正常對照尿液蛋白表達變化

     

  

2 .2 ELISA大樣品驗證血管抑制素作為潛在的SLE生物標志物

 

收集SLE 病人 (n=100),  CKD(慢性腎臟病)疾病對照組(n =24), 正常對照組 (n= 21) 的尿液樣品和血清樣品檢測Angiostatin的差異,結果顯示SLE病人組尿液Angiostatin表達極顯著高于正常對照組(p<0.0001),且顯著高于CKD組(p<0.05);  ROC分析結果顯示Angiostatin 能很好的分辨正常和SLE、活動期SLE和穩定期SLE; 而分辨CKD與SLE的效果一般。而血清樣品Angiostatin在幾組中的差異不顯著。

 

  

  

 2.3  Angiostatin表達與疾病不同分期的相關性分析

 
 

2.4 免疫組化檢測腎組織Angiostatin表達

尿液Angiostatin的表達在不同分期的SLE都有顯著差異,而血清與尿液中的Angiostatin表達沒有相關性, 免疫組化結果顯示SLE  IV期病人腎組織Angiostatin高表達, 我們推測尿液中的Angiostatin高表達并非來源于血清,而有可能是來源于腎,尤其是腎小管細胞。

 
 
 

2.5 WB初步探討尿液血管抑制素的表達分子機制

 

   


 

結論

尿血管抑素是一種新的無創性系統性紅斑狼瘡腎臟疾病標志物,具有潛在的應用價值。
RayBiotech抗體芯片在該研究中起到非常重要的指引作用。
 

本文使用RayBiotech AAH-CYT-G4000 細胞因子抗體芯片 

 

4-1BB
(TNFRSF9/CD137)

ACE-2

Adiponectin
(ACRP30)

Activin A

Adipsin
(Complement Factor D)

AgRP

ALCAM
(CD166)

Alpha-fetoprotein

Amphiregulin

Angiogenin

Angiopoietin-1

Angiopoietin-2

ANGPTL4

Axl

CD80
(B7-1)

Beta-2 Microglobulin

BCAM

BCMA
(TNFRSF17)

BDNF

beta IG-H3

bFGF

BLC
(CXCL13)

BMP-4

BMP-5

BMP-6

BMP-7

beta-NGF

Betacellulin
(BTC)

CA125

CA15-3

CA19-9

CA9

Cardiotrophin-1
(CT-1)

Cathepsin S

HCC-1
(CCL14)

6Ckine
(CCL21)

CCL28
(MEC)

CD14

CD23

CD30
(TNFRSF8)

CD40
(TNFRSF5)

CD40 Ligand
(TNFSF5)

CEA

CEACAM-1

CK beta 8-1
(CCL23)

CNTF

Cripto-1

CRP
(C-Reactive Protein)

CTACK
(CCL27)

CXCL16

DAN

Decorin

DKK-1

Dkk-3

Dkk-4

CD26
(DPPIV)

DR6
(TNFRSF21)

Dtk

E-Cadherin

EDA-A2

EGF

EGFR

EG-VEGF
(PK1)

ENA-78
(CXCL5)

Endoglin
(CD105)

Eotaxin-1
(CCL11)

Eotaxin-2
(MPIF-2/CCL24)

Eotaxin-3
(CCL26)

TROP1
(EpCAM)

ErbB2

ErbB3

Erythropoietin R

E-Selectin

Fas
(TNFRSF6/Apo-1)

Fas Ligand
(TNFSF6)

Fc gamma RIIB/C
(CD32B/C)

Ferritin

FGF-4

FGF-6

FGF-7
(KGF)

FGF-9

Flt-3 Ligand

FLRG

Follistatin

Fractalkine
(CX3CL1)

FSH

Furin

Galectin-7

GCP-2
(CXCL6)

GCSF

GDF-15

GDNF

GITR
(TNFRSF18)

GITR Ligand
(TNFSF18)

GM-CSF

GRO alpha/beta/gamma

GRO alpha
(CXCL1)

Growth Hormone

HB-EGF

HCC-4
(CCL16)

hCG intact

HGF

HVEM
(TNFRSF14)

I-309
(TCA-3/CCL1)

ICAM-1
(CD54)

ICAM-2
(CD102)

ICAM-3
(CD50)

IFN-gamma

IGFBP-1

IGFBP-2

IGFBP-3

IGFBP-4

IGFBP-6

IGF-1

IGF-1 R

IGF-2

IL-1 R2

IL-1 R4
(ST2)

IL-1 R1

IL-10

IL-10 R alpha

IL-10 R beta

IL-11

IL-12 p40

IL-12 p70

IL-13

IL-13 R alpha 2

IL-13 R1

IL-15

IL-16

IL-17A

IL-17B

IL-17C

IL-17F

IL-17 RA

IL-18 BP alpha

IL-18 R beta
(AcPL)

IL-1 alpha
(IL-1 F1)

IL-1 beta
(IL-1 F2)

IL-1 ra
(IL-1 F3)

IL-2

IL-2 R beta
(CD122)

IL-2 R gamma
(Common gamma Chain)

IL-2 R alpha

IL-21 R

IL-22

IL-28A
(IFN-lambda 2)

IL-29
(IFN-lambda 1)

IL-3

IL-31

IL-4

IL-5

IL-5 R alpha

IL-6

IL-6 R

IL-7

IL-8
(CXCL8)

IL-9

Insulin

IP-10
(CXCL10)

I-TAC
(CXCL11)

LAP/TGF beta 1

Leptin

Leptin R

LIF

Light
(TNFSF14)

LIMPII

L-Selectin
(CD62L)

Luteinizing hormone

Lymphotactin
(XCL1)

LYVE-1

Marapsin

MCP-1
(CCL2)

MCP-2
(CCL8)

MCP-3
(MARC/CCL7)

MCP-4
(CCL13)

M-CSF

M-CSF R

MDC
(CCL22)

MICA

MICB

MIF

MIG
(CXCL9)

MIP-1 alpha
(CCL3)

MIP-1 beta
(CCL4)

MIP-1 delta
(CCL15)

MIP-3 alpha
(CCL20)

MIP-3 beta
(CCL19)

MMP-1

MMP-10

MMP-13

MMP-2

MMP-3

MMP-7

MMP-8

MMP-9

MPIF-1
(CCL23)

MSP alpha/beta

NAP-2
(PPBP/CXCL7)

NCAM-1
(CD56)

NGFR
(TNFRSF16)

Nidogen-1

NrCAM

NRG1-beta 1
(HRG1-beta 1)

NT-3

NT-4

Oncostatin M

Osteopontin
(SPP1)

Osteoprotegerin
(TNFRSF11B)

PAI-1

PARC
(CCL18)

PDGF-AA

PDGF R alpha

PDGF R beta

PDGF-AB

PDGF-BB

PECAM-1
(CD31)

PLGF

Platelet factor 4
(CXCL4)

Procalcitonin

Prolactin

PSA-free

PSA-total

RAGE

RANK
(TNFRSF11A)

RANTES
(CCL5)

Resistin

S100 B

SAA
(Serum Amyloid A)

SCF

SCF R
(CD117/c-kit)

SDF-1 alpha
(CXCL12 alpha)

SDF-1 beta
(CXCL12 beta)

gp130

Sonic Hedgehog N-Terminal
(Shh-N)

Siglec-5
(CD170)

Siglec-9

TNF RII
(TNFRSF1B)

TNF RI
(TNFRSF1A)

TACE

TARC
(CCL17)

TECK
(CCL25)

TGF beta 2

TGF alpha

TGF beta 3

TGF beta 1

Thrombopoietin
(TPO)

Thyroglobulin

Tie-1

Tie-2

TIM-1
(KIM-1)

TIMP-1

TIMP-2

TIMP-4

TNF alpha

TNF beta
(TNFSF1B)

TRAIL R2
(TNFRSF10B/DR5)

TRAIL R3
(TNFRSF10C)

TRAIL R4
(TNFRSF10D)

Trappin-2

TREM-1

TSH

TSLP

Ubiquitin+1

uPAR

VCAM-1
(CD106)

VE-Cadherin
(CDH5)

VEGF-A

VEGFR2

VEGFR3

VEGF-C

VEGF-D

XEDAR


 

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